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送样建议

脱靶检测类产品

声明:
实验室不接收《人间传染的病原微生物名录》(点击查看)的所有样品。对于高毒性动植物等样品,必须事先通过销售、客服或运营经理与J9九游会技术人员联系,确定无高致病性和传染性后才能寄送样品。
提取风险提示和注意事项:核酸提取质量与物种及组织部位、采集方法及保存状态、提取方法及操作、实验器材及环境等因素均有密不可分的联系,尤其是三代超长提取对样本的要求更高。组织提取时可能受到上下游处理操作的影响,因此较难保证单次提取满足质量要求,客户应在寄送组织样品前进行备份。为了保障获得高质量的核酸,请务必按照送样手册所规定的准备样本。对珍贵样本或者微量样本,建议自行提取。取样过程中,需要全程佩戴手套,并且使用预冷乙醇对取样器材进行擦拭消毒,以免样本污染

1. 送样建议

  • 1.1 WGS全基因组脱靶检测

    1.1.1 细胞类样本
    样本类型 送样量 样本保存和运输
    细胞样本 ≧5×106
    建议1-2个备份
    液氮保存,干冰运输。
    细胞处理方法:
    (1)显微镜下观察,确定生长状态是否良好,是否有细菌污染;
    (2)送样前,样品做好相应处理:细胞冻存液慢冻,液氮长期保存;或离心收集细胞液,直接液氮速冻。

    1.1.2 动物组织
    样本类型 送样量 样本保存和运输
    动物组织 常规组织≧1g/份
    珍贵样本≧0.5g/份
    建议备份
    置于密封袋中,液氮速冻,干冰运输。
    动物组织处理方法:
    (1)取下新鲜组织,立即剔除结缔组织和脂肪等杂质。
    (2)将组织转移至新离心管中,用预冷的PBS溶液漂洗至将组织表面的残留血液冲洗干净。
    (3)将冲洗干净的组织样本取出并用无尘纸擦干水分,若组织体积较大,应在冰上将组织切成小块或薄片(每份约50mg),之后置于2ml旋盖冻存管内,准备标记样本名称。
    (4)迅速置于液氮中冷冻30min,然后转移至-80℃冰箱中保存。
    注意:
    禁止寄送带有人畜共患病的组织,包括但不限于病毒、细菌、寄生虫(如口蹄疫病毒、禽流感病毒、疟原虫、弓形虫等)。

    1.1.3 其他类型样本
    样本类型 送样量
    全血 ≥1.5ml 使用EDTA抗凝管收集保存
    基因组DNA ≥0.6μg

  • 1.2 Crisper Screen脱靶检测

    样本类型 送样量
    纯化的PCR产物 质量≥1.5μg,浓度≥60ng/μl,目的片段大小250-280bp最佳,靶位点尽量靠近左端或右端引物,避免设计在PCR产物中间位置,PCR产物需要提供扩增序列的上下游引物序列。
    文库 质量>30ng,体积>10μL;目的片段大小250-280bp

2. 注意事项

(1)【勿】使用TRIzol保存。
(2)取样过程中,为减少人为造成的样品间差异,可以采取如下措施:取样时间、部位、处理条件、性别、年龄、操作等过程尽可能保持一致,以免影响实验结果的可重复性和可信度。
(3)如需混样进行项目,建议寄送样本前自行混样。
(4)WGS插入检测项目后期要结合Sanger测序进行最终确定插入位置;建议的插入片段<5000bp,利于结合Sanger验证。

3. 样本打包及寄送建议

  • 3.1 样本的打包

    (1)核酸样品建议使用质量好的1.5ml或2ml 低吸附EP管装载样品,并用封口膜封口。为了防止样品管破裂,或者污染和混乱,请不要使用诸如PCR管、0.5ml EP管、八联管、96孔板、深孔板等非标准管送样。非标准管不利于样品保存以及后续实验的进行。如有样品使用非标准管制备,还请在送样前自行转管处理。
    (2)组织样本建议根据送样量使用合适规格带螺纹帽的EP管、冻存管或者离心管装载组织样品,并用封口膜封口。
    (3)为防止样品管在运输过程中受到干冰挤压破裂,最好将样品管放到50ml离心管或其他支撑物中,并在支撑物里添加棉花或卫生纸缓冲。大量样品建议将EP管放置在冻存盒中,并在冻存盒外面包裹气泡垫。如使用锡箔纸、自封袋装载的样品,为防止运输中受挤压破损,建议将锡箔纸折叠整齐装在自封袋中,在样品包装外再用气泡垫包好并固定。
    (4)对于血液样品,建议采用5-10ml 塑料抗凝采血管装载,为了防止运输过程中采血管因挤压而损坏,需要将每支采血管管身均用气泡垫包好,然后放置到塑料或纸质包装盒中。
    (5)用乙醇沉淀的样品由于运输中会有少量乙醇挥发出,建议将样品管盖用封口膜缠绕4-5圈。
    (6)为便于处理和保存,组织样品送样量请不要超过建议送样量的5倍(特殊的得率较低的样品除外)。
  • 3.2 样本的名称标识

    (1)所有的样品必须具有清晰的标记,并且简洁明了。
    (2)使用锡箔纸包装的组织样品建议在锡箔纸内外均标记样品名称,并将锡箔纸放在自封袋中,自封袋外面再标记上样品名称,防止锡箔纸上样品名称模糊引起样品混乱。
    (3)使用乙醇沉淀的核酸样品,由于挥发出的乙醇会使记号笔的标记模糊,建议用油性记号笔将样品名称写在标签纸上,然后用透明胶带将标签纸粘贴在样品管壁上,并缠绕2-3圈。
    (4)样品名称建议使用“字母+数字”命名方式标注在管盖。其他信息如日期、浓度、物种等可标注在管壁。所有标注内容需与《样品信息单》保持一致。

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